人类实体瘤浸润T淋巴细胞的分离、表型分析和极限稀释分析

通过机械释放和酶解相结合的方法，从35例人类实体瘤中获得了肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）。富含TIL的悬液中的淋巴细胞数量从每克肿瘤湿重 1 X 10(4) 到 7.6 X 10(6) 不等。通过 Ficoll-Hypaque 梯度差速离心分离的TIL制备物含有 10-95% 的 T11+ 细胞（平均 50%），肿瘤细胞是另一主要细胞成分。巨噬细胞、NK细胞、B细胞和粒细胞少见。在形态学上，TIL-T为小型未活化细胞。双重免疫荧光染色检测显示，它们表达 T11 和 T3 抗原，但不表达 IL-2 受体（IL-2R）或 HLA-DR 抗原。罕见的 T11+/IL-2R+ 细胞仅从结肠癌和肺癌中回收得到。12份TIL制备物中的平均 T4/T8 比值为 1.1 +/- 0.8。对 31/35 例肿瘤进行的单克隆抗体（MAbs）免疫组织学检查证实，浸润实体瘤的 T11+ 细胞极少表达 IL-2R，且富含TIL的悬液中的细胞含量与原位测定的结果相当。回收的TIL在一个允许几乎所有正常外周血T淋巴细胞（PBL-T）增殖的微培养系统中进行克隆。在这些培养条件下，TIL制备物（低于 0.01 至 0.39）和患者的 PBL-T（0.05 至 0.5）中增殖性T淋巴细胞前体（PTL-P）的频率均受到抑制。在所有肿瘤类型（包括原发性和转移性）的患者中均观察到了这种较低的 PTL-P 频率。