아데노바이러스-관련 바이러스 증식 IX. 생체 내 바이러스 게놈 전사 정도

핵산 하이브리다이제이션 절차를 사용하여 아데노바이러스-관련 바이러스(AAV) 데옥시리보핵산(DNA)의 전사 정도를 측정했습니다. 이 과정은 아데노바이러스 또는 단순 포진 바이러스를 헬퍼로 사용할 때 KB 세포 내에서 진행되었습니다. AAV 리보핵산이 AAV DNA와의 이합체 형성을 통해 측정되었으며, 이는 질소 셀룰로오스 필터에서 하이브리다이제이션 저해 시험이나 하이드록시아파타이트 크로마토그래피를 통해 모니터링되었습니다. 이 실험들은 헬퍼 바이러스가 존재할 때 AAV DNA의 한 가닥(티미딘이 풍부한 또는 "마이너스" 가닥)만 생체 내에서 전사된다는 이전 관찰을 확인했습니다. 그러나 이 가닥의 70%에서 80%만이 생체 내에서 전사되는 것으로 나타났습니다. 또한, 하이드록시아파타이트 크로마토그래피와 단일 가닥 DNA를 특이적으로 분해하는 뉴클레이스 S(1)를 사용하는 마이너스 가닥 연구는 최대 20%의 마이너스 가닥이 자기 상보적임을 나타냈습니다. 이 자기 상보적 서열이 생체 내에서 전사되지 않는 마이너스 가닥의 부분(20%에서 30%)의 대부분을 차지할 가능성이 높습니다.