人 plastin 基因。正常与肿瘤细胞中的比较基因结构、染色体定位及差异表达。

Plastin 是一类在真核生物进化过程中高度保守的肌动蛋白结合蛋白家族，在高等真核生物的大多数组织中均有表达。在人类中，已鉴定出两种普遍存在的 plastin 异构体（L 和 T）。L 异构体仅在造血细胞谱系中表达，而 T 异构体则存在于具有复制潜能的实体组织的所有其他正常细胞中（成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞、黑色素细胞等）。然而，在非造血来源的多种人类恶性肿瘤细胞中均发现了 L-plastin，这表明其表达是伴随实体组织肿瘤发生而诱导的。为了进一步了解 plastin 基因的性质及其在恶性肿瘤中的潜在作用，本研究克隆并测序了 L- 和 T-plastin 基因，以表征其结构及表达调控机制。研究发现每个基因的大小约为 90 kb，由 16 个外显子组成。鉴定出了所有外显子-内含子连接区序列，并证实符合经典连接区序列。从它们相似的结构和编码同源性可以明显看出，这两种 plastin 基因是由同一个祖先基因分化而来的。使用异构体特异性探针通过聚合酶链反应扩增，还将 L- 和 T-plastin 基因分别定位于 13 号染色体和 X 染色体。对正常细胞类型和 50 种肿瘤细胞系的扩展调查表明，68% 的癌和 53% 的非上皮来源其他实体瘤表现出 L-plastin 表达，而正常干细胞祖细胞则不表达。纤维肉瘤（n = 4）、卵巢癌（n = 9）、乳腺癌（n = 4）和绒毛膜癌（n = 2）合计表现出最高的 L-plastin 表达频率和水平（频率为 95%）。此外，4 种 L-plastin 阴性的肿瘤细胞系表现出 T-plastin 表达缺陷的证据，使与人类肿瘤发生相关的 plastin 异常表观发生率提高至 71%。研究提出的证据支持伴随肿瘤发生激活 L-plastin 合成的反式激活机制。此外，还证实了伴随 SV40 介导的人胚肺 MRC-5 成纤维细胞转化过程中诱导的 L-plastin 表达。最后，我们提供的证据表明 fimbrin 是第三种独特的 plastin 异构体，在小肠中特异性高表达。