多发性硬化中大剂量 Methylprednisolone 治疗可诱导外周血白细胞凋亡

背景：在多发性硬化（MS）的自然病程中，细胞凋亡被认为有助于清除发炎中枢神经系统中的 T 细胞。在实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型中，大剂量 glucocorticoid（GC）给药可诱导 T 细胞凋亡。目的：研究 MS 中静脉大剂量 GC 治疗对离体 T 细胞凋亡的影响。患者：本研究纳入了 66 例 MS 患者（28 例复发-缓解型 MS、22 例继发慢性进展型 MS 和 16 例原发慢性进展型 MS）以及 16 例因其他疾病接受 corticosteroids 治疗的对照患者。方法：在清晨 2 小时内首次输注 500 至 1000 mg methylprednisolone 之前和输注后立即采集血样。将梯度分离的外周血白细胞（PBLs）在未刺激状态下、或与 corticosteroids（阳性对照）、促有丝分裂原 phytohemagglutinin 或抗 T 细胞受体单克隆抗体一起进行培养。为了研究细胞凋亡，将 PBLs 培养过夜，并使用 TUNEL（末端转移酶介导的 dUTP 生物素缺口末端标记）或 annexin 标记联合 CD4、CD8、CD22、CD56 或 bcl-2 染色进行免疫流式细胞术分析。通过 (3)H-thymidine 掺入测定增殖。为了测定细胞因子，在培养 48 小时后收集上清液。结果：在体内 corticosteroid 治疗后，所有 3 个 MS 亚组中未受刺激的 PBLs 凋亡均显著且明显增加。荧光激活细胞分选分析显示，细胞凋亡主要累及 CD4 T 细胞。GC 治疗后自然杀伤细胞呈相对增加，而凋亡细胞比例未见改变。大剂量 GC 治疗未显著改变 T 细胞亚群中 bcl-2 的表达。与冲击治疗前采集的 PBLs 相比，GC 治疗后经 T 细胞受体刺激的 PBLs 培养上清液中 interleukin 2、interferon gamma 和 tumor necrosis factor alpha 的浓度较低。在对照组中也观察到了凋亡率和细胞因子产生的类似改变。结论：Corticosteroid 冲击治疗是白细胞凋亡的强效诱导剂。诱导凋亡可能有助于下调 T 细胞活性，从而终止中枢神经系统中的炎症。