Calnexin versagt an der Assoziation mit Substratproteinen in Glucosidase-defizienten Zelllinien

Zunehmende Beweise zeigen, dass Calnexin, ein membrandgebundener Chaperon im endoplasmatischen Retikulum, ein Lektin ist, das an neu synthetisierte Glykoproteine bindet, die teilweise bearbeitete N-verknüpfte Oligosaccharide aufweisen. Es heftet sich speziell an Kern-Glykane, von denen zwei Glukosen durch Glucosidasen I und II entfernt wurden. Mehrere aktuelle Berichte legen jedoch nahe, dass es auch an Proteine binden kann, die frei von N-verknüpften Glykane sind. Um das Ausmaß der glykaneunabhängigen Bindung zu untersuchen, haben wir zwei mutierte Zelllinien (Lec 23 und PhaR2.7) analysiert, die nicht in der Lage sind, die Kern-Glykane zu verarbeiten, da ihnen Glucosidase I oder Glucosidase II fehlt. Im Gegensatz zu den Elternzelllinien wurde festgestellt, dass die Calnexin-Bindung von Substratproteinen in diesen Zellen praktisch nicht vorhanden war. Weder zelluläre noch virale Proteine assoziierten sich mit dem Chaperon. Es wurde geschlossen, dass Glykane entscheidend für die Calnexin-Assoziation sind und dass die überwiegende Mehrheit der Substratproteine daher Glykoproteine sind.