塑料微反应器中的高灵敏度PCR检测

小体积操作和快速热循环是微反应器芯片开发中众多报告的主题。然而，尽管从临床和/或环境样本中检测稀有靶标或微量基因组材料对微流体设备而言是一项巨大挑战，微PCR反应器的灵敏度方面尚未得到详细研究。在本研究中，设计、构建并测试了一种蛇形薄（0.75 mm）聚碳酸酯塑料PCR微反应器，不仅评估其快速操作和效率，还评估其在扩增大肠杆菌（E. coli）K12特异性基因片段时的检测灵敏度和特异性。在模板浓度低至10个E. coli细胞（相当于50 fg基因组DNA）时，K12特异性基因产物（221 bp）在30分钟内进行了30个循环的充分扩增。PCR微反应器的灵敏度通过其在存在2%血液时从10个细胞中扩增K12特异性基因的能力得以证明。聚碳酸酯PCR微反应器的特异性也通过多重PCR和/或不同病原体特异性基因的扩增得以验证。据我们所知，这是在塑料一次性微PCR设备中进行的首次系统性检测灵敏度和特异性研究。