绵羊瘤胃微生物氨的产生及能在肽和氨基酸上生长的细菌的计数、分离和表征

瘤胃中氨（NH(3)）的过量产生是反刍动物主要的营养低效。进行了一系列实验，以比较不同底物在瘤胃液中体外氨的产生速率，并评估无糖细菌在氨产生中的作用。瘤胃液来自四只接受混合干草-浓缩饲料饮食的瘤胃造口羊。根据底物、其浓度和使用的方法，来自胰蛋白酶的氨生产速率计算值在1.8至19.7 nmol mg 蛋白质(-1) min(-1)之间变化。5微摩尔的单抗霉素抑制来自蛋白质、肽和氨基酸的氨生产，底物在2 mg/ml时平均抑制28%，而在20 mg/ml的底物时抑制48%（P = 0.011）。在总细菌群体中，1.4%仅在胰蛋白酶上生长，其中93%被5微摩尔单抗霉素消灭。仅有更少的细菌（总数的0.002%）在氨基酸上生长。从四只羊中获得了十九个能够在胰蛋白酶上生长的分离株。16S核糖体DNA和传统鉴定方法表明这些细菌分为六个组别。所有细菌对单抗霉素敏感，除了一组（第三组，与Atopobium minutum相似）外，所有细菌在>250 nmol min(-1) mg 蛋白质(-1)的条件下产生氨，具体取决于培养基，由批量培养方法确定。所有分离株均具有外肽酶活性，但仅第三组具有明显的二肽肽酶I活性。第一、第二和第四组与瘤胃和口腔的无糖梭状芽孢杆菌及真细菌属最为相关。第五组由一株与Desulfomonas piger（前称Desulfovibrio pigra）相似的分离株组成。第六组与酸氨基细菌（Acidaminococcus fermentans）有95%的相似性。Atopobium-和Desulfomonas类分离株的生长受到糖的促进，而第一、第二和第五组的生长则显著受到糖的抑制。因此，本研究表明，不同的方法和不同的底物浓度提供了不同研究中报告的瘤胃氨产生速率差异的解释，并识别了绵羊瘤胃中一系列多样的高氨产生细菌。