Dynamische in vivo-Bildgebung von postimplantierten Säugetierembryos mittels Ganzembryokultur

Aufgrund der inneren Natur der Säugetierentwicklung ist ein Großteil der durchgeführten Forschung statischer Natur und hängt von Interpolation zwischen Entwicklungsphasen ab. Dieser Ansatz kann die dynamischen Interaktionen, die für die normale Entwicklung wesentlich sind, nicht erforschen. Während die Rollenkultur das Problem der Unzugänglichkeit des Embryos überwindet, macht die ständige Bewegung des Mediums und der Embryos eine Beobachtung und Aufzeichnung der Entwicklung unmöglich. Wir haben ein statisches Säugetierkultursystem zur Bildgebung der Entwicklung des Maus-Embryos entwickelt. Mit dieser Technik ist es möglich, eine normale Entwicklung über Zeiträume von 18-24 Stunden aufrechtzuerhalten. Der Erfolg der Kultur wurde anhand der Rate des Embryowendens, der Herzfrequenz, der Somitenaddition und verschiedener grober morphologischer Merkmale bewertet. Wenn diese Technik mit fluoreszierenden Markern kombiniert wird, ist es möglich, die Entwicklung spezifischer Gewebe oder die Bewegung von Zellen zu verfolgen. Um einige der Stärken dieses Ansatzes hervorzuheben, präsentieren wir Zeitrafferfilme vom embryonalen Wenden, der Somitenaddition, dem Verschluss des Neuralrohrs und der fluoreszierenden Bildgebung der Blutzirkulation im Dottersack und im Embryo.