神经丝高分子量亚基尾部结构域与微管蛋白COOH末端区域的相互作用及其受tau protein kinase II的调控

我们此前已表明，在经碱性磷酸酶处理后，神经丝通过其高分子量亚基（NF-H）与微管（MTs）发生相互作用。在此，我们研究了NF-H磷酸化对该相互作用的影响。tau protein kinase II（一种Ser/Thr protein kinase）使NF-H尾部结构域磷酸化，将其电泳迁移率降低至天然水平，并恢复了其与MTs相互作用减弱的特性。经cAMP-dependent protein kinase磷酸化未引起电泳迁移率改变，也未引起与MTs的解离。我们得出结论，NF-H的尾部结构域直接与MT表面相互作用，且该相互作用受类似tau protein kinase II的Ser/Thr protein kinase对NF-H尾部结构域磷酸化的调控。为表征NF-H在MTs上的结合结构域，我们对MTs进行了枯草杆菌蛋白酶消化，并与tau蛋白的MT结合片段进行了竞争分析。NF-H与经枯草杆菌蛋白酶消化的MTs的解离常数高于与完整MTs的解离常数。当存在tau片段时，NF-H的最大结合量降低。这些结果表明，微管蛋白的COOH末端区域参与了与NF-H的结合，且NF-H和微管相关蛋白的结合结构域在MTs表面紧密相邻。