人真核翻译起始因子3（eIF3）的功能性重组

高等真核生物中的蛋白质命运受三种共享保守结构元件的复合物控制：蛋白酶体、COP9信号体以及真核翻译起始因子3（eIF3）。在此，我们在 Escherichia coli 中重组了含13个亚基的人 eIF3，揭示出其结构核心是在蛋白酶体 lid 复合物和 COP9 信号体中具有保守直系同源物的八个亚基。eIF3 中的这一结构核心可结合核糖体小（40S）亚基、参与 mRNA 帽子依赖性起始的翻译起始因子，以及丙型肝炎病毒（HCV）内部核糖体进入位点（IRES）RNA。添加其余的 eIF3 亚基使重组 eIF3 能够与 HCV IRES 组装成完整的起始复合物。重组 eIF3 的负染色电镜重构进一步揭示了分子量约为 400 kDa 的结构核心是如何组织高度柔性的 800 kDa 分子量 eIF3 复合物，并介导翻译起始的。