Key points are not available for this paper at this time.
يحتوي الهايبرثيرموفيل المتخمر بايروكوكوس فوريواس على إنزيم هيدروجيناز (هيدروجيناز I) يعتمد على NADPH وهو هيتيروتيترامر (ألفا بيتا غاما دلتا)، ويعمل في السيتوبلازم ويحفز إنتاج H(2) وتقليل الكبريت العنصري إلى H(2)S. هنا يتم وصف تنقية إنزيم ثانٍ من هذا النوع، وهو الهيدروجيناز II، من نفس الكائن الحي. يتمتع الهيدروجيناز II بوزن جزيئي نسبى (M(r)) يبلغ 320,000 +/- 20,000 ويحتوي على أربع وحدات فرعية مختلفة بأوزان جزيئية نسبية تبلغ 52,000 (ألفا)، 39,000 (بيتا)، 30,000 (غاما)، و24,000 (دلتا). كان الهيدروجيناز الهتيروتيترامر يحتوي على النيكل (0.9 +/- 0.1 ذري/مول)، الحديد (21 +/- 1.6 ذرة/مول)، والفلين أدنين ثنائي النيكل (FAD) (0.83 +/- 0.1 مول/مول). كان NADPH وNADH فعّالين بنفس القدر كمانحين للإلكترونات لإنتاج H(2) مع قيم K(m) بالقرب من 70 ميكرومول وقيم k(cat)/K(m) بالقرب من 350 دقيقة(-1) ملي مول(-1). على عكس الهيدروجيناز I، حفز الهيدروجيناز II تقليل NAD المعتمد على H(2) (K(m)، 128 ميكرومول؛ k(cat)/K(m)، 770 دقيقة(-1) ملي مول(-1)). لم يكن الفيريدوكسين من بايروكوكوس فوريواس حاملًا فعالًا للإلكترونات لأي من الإنزيمين. عمل كل من H(2) وNADPH كمانحين للإلكترونات لتقليل الكبريت العنصري (S(0)) والبولي كبريتيد بواسطة الهيدروجيناز I والهيدروجيناز II، وكلا الإنزيمين يفضّلان تقليل البولي كبريتيد إلى كبريتيد بدلاً من البروتونات إلى H(2) باستخدام NADPH كمانح للإلكترونات. تم الكشف عن اثنين على الأقل من مجموعات 4Fe-4S وواحدة من 2Fe-2S في الهيدروجيناز II بواسطة مطيافية الرنين المغناطيسي الإلكتروني، لكن تحليلات تسلسل الأحماض الأمينية أشارت إلى وجود خمسة مجموعات 4Fe-4S (اثنين في الوحدة الفرعية بيتا وثلاثة في الوحدة الفرعية دلتا) ومجموعة واحدة من 2Fe-2S (في الوحدة الفرعية غاما)، بالإضافة إلى موقعين متوقعين لارتباط النيوكليوتيد في الوحدة الفرعية غاما يُعتقد أنهما يرتبطان بالـ FAD وNAD(P)(H). أظهرت تسلسلات الأحماض الأمينية للوحدات الفرعية الأربعة للهيدروجيناز II تشابهًا يتراوح بين 55% و63% مع تلك الخاصة بالهيدروجيناز I. يتواجد الإنزيمان في السيتوبلازم تقريبًا بنفس التركيز. قد يصبح الهيدروجيناز II ذا أهمية فسيولوجية عند تركيزات منخفضة من S(0) نظرًا لأنه يتمتع ب Affinity أعلى من الهيدروجيناز I لكل من S(0) والبولي كبريتيد.
درس ما وآخرون (السبت) هذا السؤال.