由黑色素瘤分化相关基因 5 编码的 RNA 解旋酶是临床无肌病性皮肌炎患者的主要自身抗原：与快速进展性间质性肺疾病的相关性

目的：鉴定与临床无肌病性皮肌炎（C-ADM）和快速进展性间质性肺疾病（ILD）相关的自身抗体所识别的自身抗原。方法：使用抗 CADM-140 抗体阳性的典型血清样本筛选 HeLa 细胞来源的互补 DNA（cDNA）文库。通过使用抗 CADM-140 抗体阳性和抗 CADM-140 抗体阴性血清对其体外转录和体外翻译产物进行免疫沉淀，进一步评估所选的 cDNA 克隆。对转染了推测抗原的 COS-7 细胞裂解物进行类似检测。利用重组 CADM-140 抗原建立了用于检测抗 CADM-140 抗体的酶联免疫吸附测定（ELISA），并在 294 例不同结缔组织病患者中评估了其对 C-ADM 和快速进展性 ILD 的特异性和敏感性。结果：通过 cDNA 文库筛选以及体外转录和体外翻译产物的免疫沉淀，我们获得了编码黑色素瘤分化相关基因 5（MDA-5）的 cDNA 克隆。患者血清中的抗 CADM-140 抗体与转染全长 MDA-5 cDNA 的细胞中表达的 MDA-5 蛋白发生特异性反应，证实了 MDA-5 即为 CADM-140 自身抗原。与“金标准”免疫沉淀测定相比，以重组 MDA-5 蛋白为抗原的 ELISA 分析敏感性为 85%，分析特异性为 100%，有助于识别 C-ADM 和/或快速进展性 ILD 患者。结论：鉴于 MDA-5 编码的 RNA 解旋酶是参与抗病毒固有免疫防御的关键分子，病毒感染可能在 C-ADM 和快速进展性 ILD 的发病机制中起重要作用。此外，我们使用重组 MDA-5 蛋白的 ELISA 使抗 CADM-140 抗体的常规检测成为可能。