来自 Thermotoga sp. 2812B 能够高效水解多种天然类黄酮二糖苷的嗜热嗜酸性 GH78 α-L-鼠李糖苷酶的表征

α-L-鼠李糖苷酶能够特异性水解植物天然糖苷，在功能性食品、保健品和制药工业的生物催化应用中具有巨大潜力。在此，通过基因组挖掘鉴定了来自 Thermotoga sp. 2812B、属于糖苷水解酶 78 家族的新型嗜热嗜酸性 α-L-鼠李糖苷酶 TsRha，并通过生物信息学、计算机辅助结构分析和生物化学表征对其进行了全面表征。TsRha 具有包含一个催化 (α/α)6-桶状结构域和四个 β-折叠结构域的结构域构型。TsRha 在 90 °C 和 pH 5.0 条件下表现出最佳活性，在 80 °C 下具有显著的热稳定性，并对有机溶剂具有相当的耐受性。TsRha 表现出广泛的底物选择性，可高效水解来自不同苷元亚组（黄烷酮、黄酮、黄酮醇和二氢查尔酮）且具有多种糖苷键（α-1, α-1, 2, α-1, 6）的一系列天然类黄酮糖苷。此外，它对多种天然类黄酮二糖苷（芦丁、柚皮苷、柚皮苷二氢查尔酮、橙皮苷和曲克芦丁）表现出高转化效率，在 20~100 min 内实现 ≥99.1% 的转化率。高活性、嗜热性、嗜酸性、良好的热稳定性以及广泛的底物谱等优异特性，将使 α-L-鼠李糖苷酶 TsRha 成为一种极具前景的生物催化剂，用于高效生产生物利用度和生物活性更高的稀有及高价值类黄酮葡萄糖苷。