野生型或肿瘤来源的截短默克尔细胞多瘤病毒大 T 抗原的高亲和力 Rb 结合、p53 抑制、亚细胞定位和转化功能

无标签：多瘤病毒编码的肿瘤抗原（T-Ag）对抑癌通路的干扰可导致转化。因此，人们认为由默克尔细胞多瘤病毒（MCPyV，一种在约 90% 的默克尔细胞癌 [MCC] 病例中整合的病毒）编码的 T-Ag 是肿瘤发生的主要贡献者。MCPyV 大 T 抗原（LT-Ag）保留了所有家族成员中存在的关键功能结构域，但同时也获得了侧翼为 LxCxE 基序的独特区域。由于这些区域可能介导独特功能，或可能调节与其他多瘤病毒 T-Ag 共享的功能，因此需要对 MCPyV T-Ag 进行功能研究。在这里，我们就全长或 MCC 来源的截短 LT-Ag 的生化特性、其与视网膜母细胞瘤（Rb）和 p53 蛋白结合的能力及其转化潜能进行了对比研究。我们提供的证据表明，全长 MCPyV LT-Ag 可能不直接与 p53 结合，但在报告基因测定中仍能显著降低 p53 依赖性转录。尽管含有全长或 MCC 来源的截短 LT-Ag 基因的早期区表达构建体可以转化原代乳大鼠肾细胞，但截短的 LT-Ag 并不与 p53 结合，也不降低 p53 依赖性转录。有趣的是，如免疫共沉淀和体外结合研究所显示，缩短的 LT-Ag 对 Rb 表现出极高的结合亲和力。此外，我们表明截短的 MCPyV LT-Ag 蛋白的表达水平高于野生型蛋白，并能够使 Rb 部分重定位到细胞质中，这表明截短的 LT 蛋白可能获得了使其区别于全长蛋白的额外特征。重要性：MCPyV 是已知的 12 种天然感染人类的多瘤病毒之一。在这些病毒中，它尤为令人关注，因为它是已知唯一参与肿瘤发生的人类多瘤病毒。MCPyV 被认为与罕见的皮肤肿瘤 MCC 存在因果关联。在这些肿瘤中，高达 90% 的所有 MCC 病例中病毒 DNA 单克隆整合到肿瘤细胞的基因组中，而且整合的 MCV 基因组在所谓的早期区域还带有特征性突变，该突变选择性地废除了病毒复制，同时保留了病毒失调细胞周期的功能。本研究描述了早期区域 T-Ag 蛋白特性、其与 Rb 和 p53 结合的能力及其转化潜能的比较研究。