使用针对吡咯啉的单克隆抗体在糖尿病组织中免疫组化检测高级糖基化终产物。

吡咯啉是糖与氨基化合物在略酸性pH下反应生成的主要美拉德化合物之一。在体内研究中，通过用关键孔螺虫血蓝蛋白-己酸吡咯啉结合物免疫Balb/c小鼠，生成了单克隆吡咯啉抗体。在660个来自一个供体的杂交瘤克隆中，260个产生了针对游离半抗原的抗体，其中两个命名为Pyr-A和Pyr-B的抗体也与L-赖氨酸吡咯啉发生交叉反应。使用Pyr-B抗体和ELISA，在与葡萄糖或3-脱氧葡萄糖酮孵育的血清白蛋白中观察到吡咯啉免疫反应性逐渐增加。在用链脲霉素诱导糖尿病后，斯普拉格-道利大鼠的血浆吡咯啉水平增加了四倍（P小于0.001），而从糖尿病人随机选择的血浆中增加了两倍。在糖尿病和老年正常肾脏的硬化肾小球以及动脉硬化的肾动脉中，观察到高度特异性的吡咯啉免疫反应性，同时在血管外和肾小管周围的硬化细胞外基质和基底膜中也有所发现。吡咯啉免疫反应性在细胞外基质中的优先定位进一步加强了这一观念，即高级糖基化反应可能导致糖尿病和老化中细胞外基质的周转减少和增厚。