活性位点结合剂引起的非竞争性抑制

长期以来，经典酶学一直被用于解析抑制剂与其酶靶标之间的相互作用。酶学工具不仅能够预测抑制剂的生物学效应，还能推动开发新型、更强效的抑制剂。旨在检测受试抑制剂与酶底物之间竞争作用的实验，是鉴定结合于活性位点的抑制剂的首选手段。抑制剂与底物之间的竞争被认为是抑制剂结合在活性位点的有力证据，而缺乏竞争则提示其结合在其他位点。然而，这一规律确实存在例外。结合活性位点的抑制剂也可能表现出非竞争性抑制模式。这种异常现象已在利用外位点（exosite）结合底物的酶、同工机制酶（isomechanism enzymes）、具有多种底物和/或产物的酶以及两步结合抑制剂中被观察到。在许多此类情况下，底物与抑制剂之间缺乏竞争的潜在机制已十分明确。利用替代底物、逆向检测酶促反应以及监测抑制的时间依赖性等手段，可用于区分“行为异常”的活性位点结合剂与真正的外位点抑制剂。