Desmontagem sequencial de SNARE e montagem do complexo GATE-16–GOS-28 mediada por atividades distintas de NSF impulsiona a fusão da membrana do Golgi

A caracterização dos mutantes de NSF de mamíferos (G274E) e de Drosophila (comatoso) revelou uma atividade de NSF conservada evolutivamente, distinta da desmontagem de SNARE dependente de ATPase, que era essencial para a fusão da membrana do Golgi. A análise da função do NSF de mamíferos durante a montagem livre de células de cisteras do Golgi a partir de fragmentos mitóticos do Golgi revelou que o NSF desmonta os SNAREs do Golgi durante a fragmentação mitótica do Golgi. Uma atividade subsequente independente de ATPase, restrita à fase de reassemblagem, é essencial para a fusão de membranas. NSF/alpha-SNAP catalisam a ligação de GATE-16 ao GOS-28, um v-SNARE do Golgi, de uma maneira que requer ATP, mas não a hidrólise de ATP. GATE-16 é essencial para a reassemblagem do Golgi impulsionada por NSF e impede o GOS-28 de se ligar ao seu t-SNARE correspondente, syntaxin-5. Sugerimos que isso ocorra no início da reassemblagem do Golgi para proteger o v-SNARE e regular a função do SNARE.