经 v-fms 和 v-fes 癌基因转化的细胞中鸟嘌呤核苷酸依赖性磷脂酰肌醇4,5-二磷酸磷脂酶C的研究。

本研究在水貂肺上皮细胞系及其经含有 v-fms 或 v-fes 癌基因的猫肉瘤病毒转化的亚克隆中研究了磷脂酰肌醇（PtdIns）的代谢。转化细胞系具有更高的 PtdIns 周转率，但未显示出磷酸化 PtdIns 种类水平或 PtdIns 激酶活性的升高。与未转化的亲本细胞系（CCL64，2 pmol/min/mg of protein）相比，在两种转化细胞系中均检测到鸟嘌呤核苷酸激活的 PtdIns-4,5-二磷酸磷脂酶C的比活性显著升高（F3CL7(v-fes) 为 55 pmol/min/mg of protein，G2M(v-fms) 为 18 pmol/min/mg of protein）。鸟嘌呤核苷酸刺激的磷脂酶C活性对 PtdIns-4,5-二磷酸具有特异性，且水溶性水解产物为 1,4,5-三磷酸肌醇。GTP 和不可水解的 GTP 类似物均可激活该磷脂酶C，而 ATP 作用较弱，GDP 则无活性。该磷脂酶C活性在 9 mM 胆酸钠存在下活性最高，具有 pH 6.5 的尖锐最适 pH，且不被钙激活，尽管高浓度的 EDTA 会抑制水解作用。这些数据表明，由于鸟嘌呤核苷酸依赖性 PtdIns-4,5-二磷酸特异性磷脂酶C的激活，转化细胞中二酰甘油和 1,4,5-三磷酸肌醇第二信使的生成增加，并提示异常的非激素依赖性信号的产生与编码酪氨酸特异性蛋白激酶的癌基因所致的细胞转化相关。