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使用碳二亚胺将游离酸形式的 L-triiodothyronine 与 HSA、BSA 或 RSA 偶联。该偶联物每摩尔蛋白质含有 11–17 摩尔 T3。用各偶联物分别对兔进行免疫。免疫 6 周后,所有动物均获得了针对 T3 的抗体。采用放射免疫分析程序对一种用 T3-HSA 制备的抗血清进行了详细研究。该抗血清在 1:1000 至 1:4000 的最终稀释度下有效,且具有足够的灵敏度以测定每个测定管中 50 pg 的未标记 T3。研究了 30 种酪氨酸和甲状腺原氨酸衍生物与 T3 竞争结合抗体的能力,以评估该测定法的特异性。抗体识别涉及以下结构要求:两个酚环;一个 3′ 碘;4′ 羟基以及 5′ 氢。丙氨酸侧链的改变降低了抗体识别,但其影响程度远小于酚环结构改变带来的影响。因此,该抗血清对 L-T3 及其丙氨酸侧链衍生物具有高度特异性。文中给出了人血清中 T3 测定的初步结果。
Gharib et al. (Wed,) 对这一问题进行了研究。
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