蛋白激酶C在神经元培养物中对血管紧张素II结合位点的调节

为了研究蛋白激酶C（PKC）在调节血管紧张素II（ANG II）特异性结合位点表达中的特异性和机制，测量了125I-ANG II的放射性配体结合和钙磷脂依赖性PKC活性，这些培养物来源于1天大大鼠的脑组织。之前研究表明，PKC激活的佛波酯会增加神经元培养物中125I-ANG II的特异性结合。然而，佛波酯具有许多生物效应，可能会非特异性地增加125I-ANG II的特异性结合。本研究中，mezerein和teleocidin A，这两种与佛波酯化学结构无关的PKC激活剂，以剂量和时间依赖的方式增加了125I-ANG II的特异性结合，50%有效剂量（ED50）分别为32和79 nM。PKC拮抗剂H-7剂量依赖性地抑制了佛波12-肉豆蔻酸13-醋酸（TPA）刺激的125I-ANG II结合增加，而通过持续24和48小时的佛波酯处理下调PKC活性，防止了TPA刺激的125I-ANG II特异性结合的增加。TPA（0.8微摩尔）、mezerein（0.76微摩尔）和teleocidin A（0.5微摩尔）都在15分钟内导致PKC活性迅速从细胞质转移到颗粒分数。在时间上，mezerein、teleocidin A和TPA对PKC转移的最大刺激发生在它们刺激最大125I-ANG II特异性结合能力之前。综合来看，这些结果表明，PKC直接参与ANG II特异性结合位点表达的刺激，并且PKC的转移是ANG II结合位点 expresión 增加的先决条件。