Gezielte Evolution der Trimethoprim-Resistenz in Escherichia coli

Die gezielte Evolution ist ein nützliches Werkzeug in der Untersuchung von Enzymen. In dieser Studie wird sie verwendet, um die Mittel zu untersuchen, durch die die Resistenz gegen das Antibiotikum Trimethoprim in Dihydrofolatreduktase von Escherichia coli entwickelt wird. Mutanten mit klinischen Resistenzlevels wurden bereits nach drei Generationen erhalten. Nach vier Generationen gezielter Evolution wurden mehrere Mutanten charakterisiert, zusammen mit einigen Punktmutanten, die erstellt wurden, um interessante Aminosäureänderungen zu untersuchen. Mehrere Mutationen wurden identifiziert, die Resistenz gegen Trimethoprim verleihen, sowohl durch Verringerung der Bindungsaffinität des Enzyms für das Medikament als auch durch Erhöhung der Aktivität des Enzyms.