应用槲皮素研究Hsp70沉默对烟草转基因植物病毒感染的影响

黄瓜花叶病毒（PepMV）是影响全球番茄植物的机械传播病原体。与其他植物病毒类似（Verchot, 2012），热休克同源蛋白70（Hsc70）被鉴定为PepMV外壳蛋白（CP）的相互作用者（Mathioudakis et al., 2012）。在这里，我们描述了一种药理学方法，通过使用槲皮素来沉默植物中的Hsp70（Mathioudakis et al., 2014），槲皮素是一种Hsp70蛋白表达的黄酮类抑制剂（Hosokawa et al., 1990；Manwell和Heikkila 2007）。在Hsp70的情况下，这种方法比通过反转录基因组学实验（例如VIGS方法）沉默Hsp70更快、更简单。将2到3周大的完全展开的烟草转基因植物的叶片用注射器浸泡，使用的溶液为槲皮素（溶解于DMSO中）或DMSO（对照植物）。该植物通过机械接种被感染PepMV病毒。接种后4天，通过免疫印迹分析对局部叶片中的Hsp70和PepMV的积累进行了分析.