In vitro comparative evaluations of the postantifungal effect: synergistic interaction between flucytosine and fluconazole against Candida albicans

Summary. In vitro comparative evaluations were performed to study the efficacy of combinations of flucytosine and fluconazole in producing a postantifungal effect (PAFE) on Candida albicans . Initial studies were done to determine MIC, FIC (fractional inhibitory concentration) and optimal PAFE parameters. A turbidometric method was used to measure yeast cell growth following exposure to different concentrations of the two drugs for periods of 0.5, 1 or 2 h at temperatures of 30 d̀C and 37 d̀C. The PAFE was determined by the difference in time (h) required for growth of the control and test cultures to reach the 0.5 absorbance level following removal of the drug by dilution. Ten strains of C. albicans were then assayed (30 d̀C; 2 h exposure time) and a synergistic PAFE was evidenced with the two drugs at concentrations well below their individual MICs. PAFEs ranging from 3.8 to 10.5 h, which persisted for 1.2–2.5 h longer than those achieved with either agent separately, were evidenced when flucytosine and fluconazole were combined (flucytosine: fluconazole ratios of 1: 16–1: 32) at concentrations ranging from 0.024 to 0.098 μg ml ‐1 and 0.78 to 1.56μg ml“1 respectively. The concentrations of each agent required to produce an optimal PAFE varied according to the C. albicans strain being assayed. Zusammenfassung. Kombinationen von Flu‐cytosin und Fluconazol wurden in einer verglei‐chenden Studie in vitro auf den postantifungalen Effekt (PAFE) an Candida albicans untersucht. In Vorversuchen wurden die minimale Hemmkon‐zentration (MIC) sowie die Synergismus/Antago‐nismus‐Koeffizienten (FIC) und die optimalen PAFE‐Parameter bestimmt. Das Wachstum der Hefezellen nach Exposition gegenüber unter‐schiedlichen Konzentrationen der beiden Wirk‐stoffe wurde bei 30 d̀C und 37 d̀C nach 0.5, 1, oder 2 h turbidimetrisch bestimmt. Der PAFE war definiert durch den Zeitunterschied (h), der für die Kontroll‐ und Testkulturen benötigt wurde, das Absorptionsniveau 0.5 nach Wirkstoffelimi‐nation durch Herausverdünnen zu erreichen. An 10 C. albicans‐Stämmen (30d̀C, 2h Expositions‐zeit) konnte ein synergistischer PAFE der beiden Wirkstoffe mit Konzentrationen nachgewiesen werden, die deutlich unter ihrer individuellen MIC lagen. Die PAFEs mit der Flucytosin‐Fluconazol‐Kombination 1: 16 bis 1:32 lagen im Bereich von 3.8 bis 10.5 h und bestanden 1.2 bis 2.5 h länger als die, die mit jedem Wirkstoff einzeln zu erreichen waren; die Konzentrationen dieser Kombinationen lagen hierbei zwischen 0.024 bis 0.098 μg ml ‐1 beziehungsweise bei 0.78 bis 1.56 μg ml ‐1 . Die Konzentrationen, die für jeden Wirkstoff notwendig waren, um einen optimalen PAFE zu erzeugen, variierten von einem C. albicans ‐Stamm zum anderen.