Mehrere Tropomyosin-Polypeptide in Hühnerembryo-Fibroblasten: Differenzielle Repression der Transkription durch Rous-Sarkomavirus-Transformation

Wir haben festgestellt, dass zytoskelettale Extrakte von kultivierten Hühnerembryo-Fibroblasten mindestens sieben verschiedene Polypeptide (zwei Haupt- und fünf Nebenformen) enthalten, die mit Antiserum gegen Hühnermuskeltropomyosin kreuzreagieren. Diese Polypeptide haben eine scheinbare Molekülmasse von 31.000 bis 47.000, und jedes ist kodiert durch mRNAs, die spezifisch an klonierte Muskel-Tropomyosin-cDNAs hybridisieren. Diese nicht-muskulären Tropomyosin-Arten und ihre jeweiligen mRNAs sind elektroforetisch von denen des Hühnermuskels unterscheidbar und scheinen laut genomischer DNA-Blotting ein Teil einer Multigenfamilie für Tropomyosin zu sein. In durch Rous-Sarkomvirus transformierten Hühnerembryo-Fibroblasten ist die Synthese der Tropomyosine differential repressiert, sodass die Synthese der Hauptarten (cp35 und cp33, zytoskelettale Proteine mit einer Molekularmasse von 35.000 bzw. 33.000) und drei Nebenarten drastisch reduziert ist, während die Synthese von zwei der Nebenarten (cp32 und cp31) im Wesentlichen unverändert bleibt. Die Analyse der zellulären mRNA und Experimente zur nuklearen Transkription zeigen, dass die Repression der Tropomyosinsynthese durch die Rous-Sarkomvirus-Transformation auf der Transkriptionsebene erfolgt. Diese Repression der Tropomyosinsynthese wird teilweise in normalen Hühnerembryo-Fibroblasten während der Inkubation in hoch-natriumchloridhaltigem Medium nachgeahmt, einem Zustand, in dem Hühnerembryo-Fibroblasten viele Eigenschaften von transformierten Zellen erwerben.