A comparative analysis between [32P] and digoxigenin-labelled single-copy probes for RFLP detection in wheat

The RFLP technique is widely used in plant-genome mapping and other genetic analyses.While it has great potential as a tool for plant breeders, the requirement for radioisotopes has limited its routine use.Here, we have used a commercially available nonisotopic method, the digoxigenin-labelling and detection system (Boehringer Mannheim), with modifications, to analyse a complex polyploid genome such as wheat, and have obtained results equivalent to the isotopic method.The detailed experimental procedures are described.This nonisotopic method will facilitate various RFLP-based genome analyses.RFLP / digoxigenin / nonradioactive method / chemiluminescence / Triticum aestivum = wheat Résumé -Analyse comparative entre les sondes mono-copie marquées au [ 32 P] et à la digoxigénine pour la détection de PLFR chez le blé.Le polymorphisme de longueur des fragments de restriction (PLFR) a été largement utilisé pour l'établissement de cartes génétiques des plantes et pour diverses études génétiques.Bien qu'elle présente d'intéressantes potentialités et perspectives pour les sélectionneurs, l'utilisation des élé- ments radioactifs dans cette technique a limité son application en routine.Nous avons modifié et amélioré une des méthodes non radioactives commercialement disponibles, le marquage à la digoxigénine (Boehringer Mann- heim), pour l'analyse d'un génome polyploïde tel que le blé.Les résultats obtenus sont comparables à ceux de la méthode radioactive.Les procédures expérimentales sont décrites en détail.Cette méthode non radioactive devrait faciliter tous les types d'analyses des génomes par la méthode PLFR.PLFR / digoxigénine / Triticum aestivum = blé