Nested polymerase chain reaction for detection of the avian leukosis virus causing so-called fowl glioma

The complete nucleotide sequence of the avian leukosis virus causing so-called fowl glioma has been previously determined. Primers were designed for detection of the fowl glioma-causal virus (FGV) based on the 3′ untranslated region of the viral genome. The provirus and viral RNA of FGV were specifically detected in various organs and tissues, including feather pulp, from experimentally infected birds using nested polymerase chain reaction (PCR) and reverse transcription nested PCR. The prevalence of FGV was evaluated in 131 Japanese fowls of a zoological garden in Japan based on the detection of the FGV genome in feather pulp using PCR and the detection of viral antigen in faeces by enzyme-linked immunosorbent assay. FGV proviral DNA was detected in feather pulp of 52 birds (39.7%) by nested PCR. Later, nine dead birds from among the 52 were histologically diagnosed as having fowl glioma and found to have the proviral DNA in the affected brain. These results demonstrated that the PCR-based detection of FGV in feather pulp is useful for epidemiological studies on fowl glioma. Réaction de polymérisation en chaîne nichée pour la détection du virus de la leucose responsable du gliome des poules La séquence nucléotidique complète du virus de la leucose aviaire responsable du gliome des poules a été précédemment déterminée. Des amorces ont été choisies pour la détection du virus responsable du gliome des poules (FGV), basées sur la région 3′ non traduite (UTR) du génome viral. Le provirus et l'ARN viral du FGV ont été détectés spécifiquement dans différents organes et tissus, incluant la pulpe de plume, à partir d'animaux infectés expérimentalement, en utilisant respectivement la réaction de polymérisation en chaîne (PCR) nichée ou une transcription inverse (RT) suivie d'une PCR nichée. La prévalence du FGV a été évaluée à partir de 131 poules japonaises d'un jardin zoologique au Japon par détection du génome du FGV dans la pulpe de plume utilisant la PCR et par détection de l'antigène viral dans les fèces par ELISA. L'ADN proviral du FGV a été détecté dans la pulpe de plume chez 52 sujets (39.7%) par PCR nichée. Par la suite, 9 sujets sur les 52 étudiés sont morts. Ils ont fait l'objet d'un examen histologique qui a montré la présence de gliome, de plus l'ADN proviral a été mis en évidence dans le cerveau affecté. Ces résultats ont montré que la détection par PCR du FGV dans la pulpe de plume est utile pour les études épidémiologiques du gliome des poules. Nested Polymerasekettenreaktion zum Nachweis von das sogenannte Geflügelgliom verursachendem aviären Leukosevirus Die komplette Nukleotidsequenz des aviären Leukosevirus, das das sogenannte Geflügelgliom induziert, ist kürzlich ermittelt worden. Basierend auf der untranslatierten Region (UTR) des viralen Genoms wurden Primer entwickelt für den Nachweis des Gefügelgliom verursachenden Virus (FGV). Das Provirus und virale RNS des FGV wurden spezifisch unter Verwendung von nested Polymerasekettenreaktion (PCR) und Reverse Transkriptase (RT) nested PCR in verschiedenen Organen und Geweben, einschließlich Federfollikeln, experimentell infizierter Tiere nachgewiesen. Das Vorkommen von FGV wurde bei 131 japanischen galliformen Vögeln in einem Zoo in Japan durch den Nachweis von FGV-Genom in Federfollikeln mittels PCR und von viralem Antigen in Fäzes anhand eines Enzymimmunotests überprüft. Provirale FGV-DNS wurde mit der nested PCR in den Federfollikeln von 52 (39,7%) Vögeln festgestellt. Später wurde bei 9 toten Vögeln von diesen 52 Vögeln histologisch Geflügelgliome diagnostiziert und in den betroffenen Gehirnen provirale DNS nachgewiesen. Diese Ergebnisse zeigen, dass der PCR basierte Nachweis von FGV in Federfollikeln für epidemiologische Studien zur Verbreitung von Geflügelgliomen geeignet ist. Reacción en cadena de la polimerasa anidada para detectar el virus de leucosis aviar que causa el llamado glioma aviar La secuencia completa del virus de leucosis aviar que causa el llamado glioma aviar ya ha sido determinado previamente. Se diseñaron cebadores para detectar el virus causante del glioma aviar (FGV) en base a la región no codificante (UTR) 3′ del genoma vírico. El provirus y el ARN vírico del FGV se detectaron específicamente en varios órganos y tejidos, incluida la pulpa de pluma, de aves infectadas experimentalmente mediante una técnica anidada de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y transcriptasa reversa (RT) PCR anidada. La prevalencia de FGV fue evaluada en 131 aves japonesas de un parque zoológico en Japón en base a la detección del genoma de FGV en pulpa de pluma utilizando la PCR y a la detección del antígeno vírico en heces mediante ELISA. El ADN del provirus de FGV se detectó en la pulpa de la pluma de 52 (39.7%) aves mediante PCR anidada. Posteriormente, a 9 aves muertas de un total de 52 se les diagnosticó histológicamente un glioma aviar y se le detectó ADN proviral en el cerebro afectado. Estos resultados demuestran que la PCR basada en la detección de FGV en pulpa de pluma es útil en los estudios epidemiológicos de glioma aviar.