Adenovirus-assoziierter Virusmultiplikation IX. Ausmaß der Transkription des viralen Genoms in vivo

Nukleinsäure-Hybridisierungsverfahren wurden verwendet, um das Ausmaß der Transkription von Adenovirus-assoziierter Virus (AAV) Desoxyribonukleinsäure (DNA) in KB-Zellen in Gegenwart von entweder Adenovirus oder Herpes-simplex-Virus als Helfer zu messen. Das Anlagern von AAV-Ribonukleinsäure an AAV-DNA wurde durch einen Hybridisierungsinhibitionsassay auf Nitrocellulosefiltern oder durch Hydroxylapatit-Chromatographie überwacht. Diese Experimente bestätigten die frühere Beobachtung, dass in Gegenwart eines Helfervirustyp nur ein Strang der AAV-DNA (der thymidinreiche oder „minus“-Strang) in vivo transkribiert wird. Es wurde jedoch festgestellt, dass in vivo nur 70 bis 80 % dieses Strangs transkribiert zu sein scheinen. Darüber hinaus deuteten Studien mit Minussträngen unter Verwendung von Hydroxylapatit-Chromatographie und Nuclease S(1), die spezifisch Einzelstrang-DNA abbaut, darauf hin, dass bis zu 20 % des Minusstrangs selbstkomplementär sind. Es scheint wahrscheinlich, dass diese selbstkomplementären Sequenzen den Großteil des Anteils des Minusstrangs (20 bis 30 %), der in vivo nicht transkribiert wird, ausmachen.