一种从大鼠肝脏快速分离核膜的方法

描述了一种快速、温和的方法，用于从分离的大鼠肝核中分离核膜。该方法采用低浓度的DNA酶I对核进行双重消化，约0.1 mM Mg 2+和轻微碱性的pH，以释放膜。电子显微镜显示核膜形态优良保存。生成的大块膜片由带有核糖体附着在外层的双层膜组成。这些层在具有明显环状亚单位和偶尔中心颗粒的核孔处连接。来自其他亚细胞结构的污染极小。核膜中的核蛋白、DNA、RNA和磷脂的回收率分别约为8%、1-3%、8%和55%。与膜相关的DNA似乎并不是来自释放DNA的重新结合。膜的酶含量与微粒体的相似。研究结论是核膜是葡萄糖-6-磷酸酶的唯一核位置。约1%的总核DNA聚合酶与核膜关联回收。通过三个标准，该酶与纯正的核DNA聚合酶相同。该发现与核膜参与DNA复制的建议背景下进行讨论。