转化生长因子-β 1对牛内皮细胞一氧化氮合酶的分子调控

内皮细胞一氧化氮合酶（ecNOS）基因的启动子区域包含转化生长因子-β 1（TGF beta 1）的潜在响应元件。TGF beta 1在动脉粥样硬化、血管肥厚和血管生成的发病机制中发挥重要作用。因此，我们旨在确定TGF beta 1是否会调节牛主动脉内皮细胞（BAEC）中的ecNOS表达。TGF beta 1以剂量依赖的方式提高了ecNOS mRNA水平。TGF beta 1还增加了ecNOS蛋白含量。通过化学发光法评估的氮氧化物（NOx）产生，以及通过精氨酸/瓜氨酸转化评估的氧化氮合酶活性在TGF beta 1处理的细胞中均有所增加。通过转染启动子/荧光素酶构建体评估，TGF beta 1提高了ecNOS基因5'-旁启动子区域的转录活性。删除分析表明，TGF beta 1响应元件位于距第一个转录起始位点-1269到-935个核苷酸之间，其中存在潜在的核因子-1（NF-1）结合位点。凝胶迁移实验显示，免疫学上与CCAAT转录因子/NF-1相似的核蛋白以序列特异性的方式结合到假定的NF-1结合位点。启动子/荧光素酶构建体中假定的NF-1结合位点突变显著降低了对TGF beta 1的响应。总之，TGF beta 1提高了与NO产生增加相关的ecNOS表达。这种响应可能通过ecNOS基因启动子的转录激活介导。