cdk4-활성화 키나제에 의한 사이클린 D-의존성 키나제 4 (cdk4)의 조절.

규제 D형 사이클린과 그들의 촉매 파트너인 사이클린-의존성 키나제 4 (cdk4)로 구성된 조립된 홀로효소의 축적은 포유류 섬유아세포에서 세포 주기 G1 단계의 진행에 대한 속도 제한 요소입니다. D형 사이클린과 cdk4의 합성과 조립은 혈청 자극에 의존하지만, 두 하위 단위가 이소발현으로 과잉 생산되더라도 혈청 결핍 세포에서는 복합체로 조립되지 않습니다. Baculovirus 벡터에서 공동 발현될 경우, cdk4는 D형 사이클린과 조립되어 활성 단백질 키나제를 형성합니다. 반면에, 곤충 세포나 박테리아에서 생성된 재조합 D형 사이클린과 cdk4 하위 단위는 시험관 내에서 결합될 때 기능적 홀로효소로 효율적으로 조립되지 않지만, 증식하는 포유류 세포에서 얻은 용해액의 존재하에 활성화될 수 있습니다. Cofected Sf9 세포에서 사이클린 D-cdk4 복합체의 조립은 cdk-활성화 키나제(CAK)에 의해 cdk4의 트레오닌 172에 대한 인산화를 촉진합니다. 이 변형이 없이는 조립이 진행될 수 있지만, CAK에 의해 인산화될 수 없는 cdk4 돌연변이는 촉매적으로 비활성 상태로 남아 있습니다. 따라서 사이클린 D-cdk4 복합체의 형성 및 결합된 촉매 하위 단위의 인산화는 독립적으로 조절되며, CAK 활성의 요구 사항 외에도 포유류 세포에서 복합체의 조립을 촉진하기 위해 혈청 자극이 필요합니다.