Sp1-vermittelte Herabregulierung der P2X4-Rezeptor-Genexpression in Endothelzellen, die mechanischem Stress ausgesetzt sind

Endotheliale Purinozeptoren spielen eine wichtige Rolle bei den vaskulären Reaktionen auf extrazelluläre Adeninnukleotide und hämodynamische Kräfte. Hier berichten wir, dass die Expression des P2X4-Purinozeptors in menschlichen endothelialen Zellen der Nabelvene transkriptionell durch Flüssigkeits-Schermstress herabreguliert wird. Wenn menschliche endothelialen Zellen der Nabelvene einem laminaren Schermstress von 15 dyn/cm(2) ausgesetzt wurden, begannen die P2X4-mRNA-Spiegel innerhalb von 1 h zu sinken und sanken mit der Zeit weiter, wobei sie nach 24 h 60 % erreichten. Funktionale Analysen des 1,9-kb P2X4 5'-Promotors zeigten, dass ein 131-bp-Segment (-112 bis +19 bp relativ zur Transkriptionsstartstelle), das eine Konsensusbindungsstelle für den Sp1-Transkriptionsfaktor enthält, entscheidend für die Reaktionsfähigkeit auf Schermstress war. Mutationen der Sp1-Stelle verringerten das basale Transkriptionsniveau und hoben die Reaktion des P2X4-Promotors auf Schermstress auf. Elektrophoretische Mobilitätsverschiebungsanalysen zeigten einen deutlichen Rückgang der Bindung von Sp1 an das Sp1-Konsenselement in schermgestressten Zellen, was darauf hindeutet, dass Sp1 die schermstressinduzierte Herabregulierung der P2X4-Genexpression vermittelt.